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革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明,是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法,未經(jīng)染色的細菌由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察,染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,用以分類鑒定,通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細菌的不同顯色反應(yīng)是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的,經(jīng)結(jié)晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物,乙醇能使它脫色,在革蘭陰性細胞染色中乙醇或丙酮破壞了胞壁外膜、損傷肽聚糖層和細胞質(zhì)膜,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物從細胞中滲漏出來,當再用其他染色液復(fù)染時,顯現(xiàn)紅色,紅色染料雖然也能進入已染成紫色的G+細胞,但被紫色蓋沒,所以紅色顯示不出來,在革蘭陽性細胞染色中乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水,導(dǎo)致孔隙變小,由于結(jié)晶紫和碘復(fù)合物分子太大,不能通過細胞壁,不易脫色,所以保持著紫色。
Leagene Rapid Gramˊs Stain采用的革蘭染色配方進一步改進,使用復(fù)紅復(fù)染液替代沙黃染色液,增強了染色效率,用于極難染色的細菌,臨床標本直接涂片,背景干凈,胞核胞質(zhì)對比強烈,胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認,細菌染色特征典型,本方案染色時間短,一般40~80s即可完成染色。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。